QQ:1932526095
蛋白表达,抗体定制
咨询电话
029-88081325
在线客服

单抗与多抗的制备方法

普罗抗体 2018-09-04

抗体的生产依赖于体内的体液免疫。很多外来分子、病毒或细胞只需简单的免疫接种,就可能诱导强烈的抗体反应,而某些物质却未能诱发强烈的抗体反应。通过修饰抗原或宿主可增强免疫系统的反应。这些修饰主要是通过实验来进行,但随着人们对免疫系统的认识已有所加深,因此可采用更趋合理的方法。
    蛋白质、肽、糖类、核酸、脂质和其他许多天然存在或合成的化合物可成功扮演免疫原的角色。肽和非蛋白抗原通常需要与载体蛋白进行偶联后才能有效发挥免疫原的作用。这是由于它们的分子量小,需要载体提供II类T受体结合部位。另外可能还需要注射佐剂来确保获得高质量/数量的反应。佐剂是免疫反应的非特异性刺激物。加入佐剂后不仅可以降低抗原的使用剂量,而且还能提高抗体反应的持久度。
Abcam的杂交瘤细胞培养
       
【多克隆抗体制备】
    通过抗原X诱发免疫反应来制备多克隆抗体。每隔几周重复利用相同的抗原来诱发免疫反应,可刺激特异性B细胞在血液中分泌出大量抗X的抗体。由于许多不同的B细胞都受到抗原X的刺激,因此血液中将包含各种抗X的抗体,它们与X的结合方式略有不同。可直接使用存在高含量特异性抗体的粗制免疫血清,也可通过亲和纯化技术将特异性抗体从血清成分中分离出来。
【单克隆抗体制备】
    要制备单克隆抗体,则采用相同的免疫方案并提取所有抗体形成细胞。将这些细胞与永生性瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,然后筛选用于制备抗体。产生抗体的杂交瘤细胞均被赋予唯一的克隆名,以便于鉴别。通过分离,然后利用组织培养法进行培养或在小鼠体内产生腹水的方式来克隆出产生抗体的杂交瘤细胞。不同于多克隆抗体,单克隆抗体是具有明确特异性的均质性抗体。可从培养基中获得此类细胞分泌出的抗体。可使用粗制的组织培养物上清液,或利用亲和纯化技术对此上清液进一步提纯。